MSC-exo的悬浮密度为1.10-1.18gm,其膜表面富含胆固醇、鞘磷脂和神经酰胺脂筏脂质及信号蛋白,外泌体内含有多种蛋白质和RNA。这些生物活性物质的种类和数量并不是始终相同,西安牙髓干细胞公司而是随着细胞的生理状态的变化而改变。
MSC=exo包含大多数外泌体共同表达的物质,西安牙髓干细胞公司包括跨膜蛋白和融合蛋白(GTP酶、膜联蛋白、浮舰蛋白)4次跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81、CD82)多泡体生成相关蛋白(AxTsSG101)、脂质相关蛋白和磷脂酶。除此之外,MSC-ex还含有MSC表达的黏附分子,包括CD29、CD44和CD73等。目前发现,MSC-exo一共含有857种蛋白质,但并非全部同时表达。在3组独立实验中,通过高精度质谱分析,检测到MSC-exo分别含有379、432、420种蛋白质,其中只有154种蛋白质共同表达。
而本课题组通过超高速离心法分离MSC-exo外泌体和PEG沉淀法分离MSC=exo,并用高精度质谱检测,分别检出169和102种蛋白质。可见MC-exo所含蛋白质的种类和丰度受到多种因素的影响,包括外泌体的分离方法、外泌体的保存手段、外泌体蛋白的检测方法细胞的生理生化状态等。因此,MSC=exo蛋白质的种类和丰度仍需进一步研究和分类。西安牙髓干细胞公司但就目前研究资料可知,MSC-exo所含蛋白质充分代表了32种生物过程,包括外泌体生成和免疫。在这些蛋白质中,与治疗作用相关的( PDGFRB、EGFR、 PLAUR)信号分子(RRAS/NRAS、MAPK1、GNA13/可能包括表面受体GNA12、CDC42和VAV2)黏附分子(FN1、EZR、 IQGAP1、CD47、整合素、 LGALSI/LGALS3)和MSC相关表面抗原。其中,蛋白酶体20S核心颗粒的7条a和7条β链MSC-exo都有表达,且免疫蛋白酶体中的3个亚基表达水平较高,提示MSC-exo损伤修复功能可能与此有关。
MSC-exo含有的RNA大多是核酸数目小于300的小RNA( small rna),其中包括microrNA(简称 mirNA)。通过微阵列杂交技术对比MSC和MSC-exo中的 mirNA发现,在166种mRNA中有15种只存在于MsC-exo中,106种只存在于MSC中,33种在两者中都表达,而有12种mRNA在MSC=exo的表达是MC的2倍。MC-o0不含28和18s核糖体,但含有其降解产物mRNA923西安牙髓干细胞公司。

MSC-exo中 miRNA主要以前体(pre- mirNA)的形式存在,与MSC细胞相比,其pre- mirNA/ mirNA比率更高,能被RNaeⅢ剪切成成熟的mirNA。这些数据提示我们,MSC-exo并非随机而是选择性的包裹MSC细胞内的小RNA,包括 mirNA、非编码RNA或者RNA降解的中间产物,而不倾向于包裹完整的mRNA或者核糖体RNA西安牙髓干细胞公司。