4.细胞纯度和均一性检验对于经过数代培养的 hUCMSC,免疫细胞存储应进行无污染检查,以保证未被其他类型细胞污染;或通过检测细胞表面标志物的方法,对制剂进行细胞纯度或均一性的检测。

5. hUCMSC表面标志检验可以通过流式细胞仪或细胞免疫化学法检测,各个hUCMSC制备实验室可根据自己的实际情况选择适合自己的检测方法,下面以流式细胞仪为例说明具体操作方法:免疫细胞存储一般选择处于对数生长期的P3-P5代细胞,胰酶消化细胞,完全培养基终止消化,吹打均匀,充池计数,一般取1×10个细胞为1~2个细胞表面标记检测用量,加入PBS充分洗涤3次,分别加入荧光标记的表面抗体避光4℃孵育30分钟或者避光室温孵育20分钟,加入PBS充分洗涤1次,上流式仪检测。脐带间充质干细胞是一群异质细胞,没有一个固定的表面标记物,一般选择CD29、CD34、CD45、CD90、CD106、CD105这几个经典指标进行检测,已知脐带间充质干细胞CD29、CD44、CD90、CD106、CD105呈阳性,且阳性率不低于95%,CD34、CD45、HLA-DR呈阴性,免疫细胞存储阳性率不高于2%;P3代以内的细胞表面标记物表达随着代次的增加阴性标记越来越少,阳性标记越来越多。
6.核型观察检验 hUCMSC经过长期的体外培养,染色体核型分析结果应显示其核型为正常核型(46,XXXY)且无易位、倒位、缺失、复制和融合等异常现象,证明 hUCMSC的核型稳定。