电 话：xxxx-00000000
传 真：xxxx-000000
邮 箱：xxxxx.cn
地 址：xxxxxxxxxx
(1)成脂诱导分化:
1)诱导方法：收集待检的 hUCMSO，按照1×103cm2接种到12孔板中静置培养，至到细胞100%甚至过度融合时，吸去10%FBS的 DMEM/F12培养基，加入成脂分化诱导培养液，每3天换液1次，诱导培养14天后,4%多聚甲醛固定30分钟后染色，显微镜下观察拍照。
2)检测方法(油红0染色)成脂肪诱导的过程中，造血干细胞存储细胞在胞质中不断有滴的累积，并不断的增加变大，zui后整个细胞的胞质中都是油滴。油红O染色的方法是对油滴的染色的一种方法。
(2)成骨诱导分化
1)诱导方法：收集待检的 hUCMSC，按照5×101m2接种到12孔板中静置培养，至细胞60%~70%融合状态时，吸去10%FBS的 DMEMF2培养基，加入成骨分化诱导培养液，每3天换液1次，诱导培养21天后,4%多聚甲醛固定30分钟后染色，显微镜下观察拍照。
2)检测方法：(茜素红染色)成骨诱导过程中钙离子以钙盐的方式沉淀下来，形成“钙结节”，造血干细胞存储细胞茜素红和钙发生显色反应，产生一种深红色的带色化合物，这样成骨诱导的细胞外沉积的钙结节也就被染成深红色。
(3)成软骨诱导分化:
1)诱导方法：收集待检的 hUCMSC，调整细胞浓度为1.6×107ml，造血干细胞存储细胞取5山接种12孔板中，静置于37℃,5%CO2培养箱中培养2小时，缓慢加入成软骨分化培养基静置培养，每3天换液1次，培养14天后,4%多聚甲醛固定、石蜡包埋软骨小球病理切片，脱蜡后染色，显微镜下观察拍照。
2)检测方法：(阿利辛蓝染色)检测软骨细胞分泌基质中的葡萄糖胺聚糖，可使软骨中硫酸软骨素、硫酸胶质素等主要成分呈现蓝色。
