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1.设计原则与方案本法系将一定量 hUCMSC注射液与2%的家兔红细胞混悬液混合，温育一定时间后，观察其对红细胞状态是否产生影响的一种方法。
2.操作方法
(1)2%红细胞混悬液的制备：取健康家兔血液，造血干细胞存储置于含玻璃珠的锥形瓶中振摇10分钟，或用玻璃棒搅动血液，以除去纤维蛋白原，使成脱纤血液。加入约10倍体积0.9%氯化钠溶液混匀,1000-1500rmin，离心15分钟，除去上清液，沉淀的红细胞再用0.9%氯化钠溶液按上述方法洗涤2~3次，至上清液清亮无色为止。将所得红细胞用0.9%氯化钠溶液制成2%的混悬液备用。
(2)细胞溶液的准备：充分混匀干细胞混悬液，取一定体积混悬液备用。
(3)检査方法：取洁净5只玻璃试管编号,1、2号管为干细胞供试品管,3号管为阴性对照管,4号管为阳性对照管,5号管为供试品对照管。按下表所示依次加人2%红细胞悬液、0.9%氯化钠溶液、纯化水，混匀后立即置于(37±0.5)℃的恒温箱中进行温育3小时后观察溶血和凝聚反应，加入顺序和量如表7-2所示。
表7-2溶血反应
3.判断标准
(1)如试管中的溶液呈澄明红色，管底无细胞残留或有少量红细胞残留，造血干细胞存储表明有溶血发生；如红细胞全部下沉，上清液无色澄明，或上清液虽有色澄明，但1、2号管和5号管肉眼观察无明显差异，则表明无溶血发生。
(2)若溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，轻轻倒转3次仍不分散，表明可能有红细胞凝聚发生，应置显微镜下观察如可见红细胞聚集为凝聚。
(3)当阴性对照管无溶血和凝聚发生，阳性对照管有溶血发生，若2支干细胞注射剂管中的溶液在3小时内均不发生溶血和凝聚，判定 hUCMSC注射液符合规定；若有1支干细胞注射剂管的溶液在3小时内发生溶血和(或)凝聚，应设4支干细胞注射剂管进行复试，其 hUCMSC注射液管的溶液在3小时内均不得发生溶血和(或)凝聚，否则判定 hUCMSC注射液不符合规定。
组织器官结构变化
Wang等在对间充质干细胞的安全性进行评价时，造血干细胞存储通过给食蟹猴反复输注间充质干细胞的给药方式和长期毒性进行了评价，食蟹猴接受4次间充质干细胞注射后对其病理组织切片等进行检测，均未发现注射了间充质干细胞对食蟹猴的各项生理指标产生不良影响。利用本实验室创制的" hUCMSC注射液”，分别以1×10细胞/kg、5×10细胞/kg和1×107细胞/kg的剂量通过静脉输入健康食蟹猴体内，结果对心、肝、肺、肾、脑等重要器官的结构无影响。
